05 december 2014

Immunohistochemie met HRP

Gisteren had ik het over de veranderingen op het oppervlak van geïnfecteerde cellen onder invloed van het Herpes Simplex Virus (HSV), voor een jonge onderzoeker een intrigerend proces dat ongetwijfeld in die tijd al lang bekend was, maar voor mij leuk onderzoeksterrein vertegenwoordigde.
Dick B. van de afdeling dermatologie was gespecialiseerd in het bereiden van superieure reagentia voor immunohistochemie, een techniek die veel weg heeft van immunofluorescentie; in plaats van een fluorescerende stof is in dit geval een enzym, het Horse Radish Peroxidase (HRP) gekoppeld aan een antistof. Dat HRP kun je dan weer goed zichtbaar maken. Een donker neerslag is dan het gevolg en dat kun je zelfs weer aankleuren voor Electronen Microscopie (EM). En zo heb ik de geïnfecteerde weefselkweekcellen ook met EM kunnen bestuderen: fascinerend. Wat ik zag waren cellen waarvan de celmembraan duidelijk was aangekleurd, dus antigenen had waarmee het anti-HSV serum had gereageerd. En dan zag je dat de rijpe HSV deeltjes, zeg maar de virussen zich juist in die gekleurde delen van een "jasje" voorzagen en de cel gingen verlaten, het proces van budding als ik me goed herinner. Het spijt me zo verschrikkelijk dat ik niet meer over die foto's beschik; ik zie die beelden nog zo voor me alsof het gisteren was.

Geen opmerkingen: